(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210620339.6 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 惠州学院 地址 516007 广东省惠州市惠城区演达大 道46号 (72)发明人 周招飞　孙佳鋆　黄谨涛　蓝玉胜　 黄宝仪　梁晓雯　周梓莹　谢海伟　 桑红莉　 (74)专利代理 机构 广东华专知识产权代理事务 所(普通合伙) 44669 专利代理师 杨振江 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C02F 3/34(2006.01)C12R 1/38(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/085(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 一种复合微生态制剂及其制备方法和在水 产养殖中的应用 (57)摘要 本申请涉及微生物改善水质技术领域， 特别 涉及一种复合微生态制剂及其制备方法和在水 产养殖中的应用， 本申请方案以施氏假单胞菌和 侧孢芽孢杆菌为主要菌群， 以蜡样芽胞杆菌、 反 硝化细菌、 酵母菌为辅助菌群进行复配制成复合 微生态制剂， 并且采用了独特的配方含量以及特 别的混合复配步骤研制， 使 得复合微生态制剂具 有更优异的降解性能， 应用复合微生物制剂对水 体进行处理， 可以有效地降解有机淤泥， 吸收利 用水体中的氨氮、 亚硝酸盐、 硫化氢等有害物质， 抑制有害微生物和有害藻类的繁殖， 平衡水体的 微生态环境， 促进养水生生物健康生长， 比普通 微生态制剂经济实惠， 更适 合推广。 权利要求书2页 说明书7页 CN 114854644 A 2022.08.05 CN 114854644 A 1.一种复合微生态制剂， 其特征在于： 包括以下重量份数的组分： 施氏假单胞菌60 ‑80 份， 侧孢芽孢杆菌 35‑45份， 辅助菌剂3 0‑50份； 所述辅助菌剂由以下重量份数的菌剂组成： 蜡样芽胞杆菌30 ‑40份、 反硝化细菌10 ‑15 份、 酵母菌10 ‑20份。 2.根据权利要求1所述的复合微生态制剂， 其特征在于： 还包括辅料， 所述辅料包括为 沸石粉、 膨润土和滑石粉， 所述沸石粉、 膨润土和滑石粉的重量比为(3 ‑5)： (2‑4)： (3‑6)。 3.根据权利要求1所述的复合微生态制 剂， 其特征在于： 所述复合菌剂中各成分的菌落 总数为： 所述施氏假单胞菌1.0 ×109～2×109cfu/ml， 所述侧孢芽孢杆菌2 ×109～3× 109cfu/ml， 所述蜡样芽胞杆菌3 ×108～4×108cfu/ml， 所述反硝化细菌2 ×108～4× 108cfu/ml， 所述酵母菌2 ×109～5×109cfu/ml。 4.一种基于权利要求1 ‑3所述的复合微生态制 剂的制备方法， 其特征在于： 包括以下步 骤： S1.制备施氏假单 胞菌和侧孢芽孢杆菌的混合培 养液； S2.制备辅助菌剂的混合培 养液； S3.将培养好的施氏假单胞菌、 侧孢芽孢杆菌和辅助菌剂按所述配比接种到发酵罐中 37℃发酵24小时， 制成菌体悬液， pH≤5.0， 菌 液中活菌数≧2 ×109～2×1010CFU/mL， 即制备 完成复合 微生态制剂。 5.根据权利要求4所述的复合微生态制 剂的制备方法， 其特征在于： 制备施氏假单胞菌 和侧孢芽孢杆菌的混合培 养液的方法包括以下步骤： a1.将施氏假单 胞菌和侧孢芽孢杆菌分别接种于固体培 养基上进行活化； a2.挑取步骤a1中两种活化好的菌种的单菌落分别接种于各自的液体培养基上， 培养 条件为： 温度28～33℃， 转数200～220rpm， 培养10～18小 时， 得到活菌数为1.0 ×109～2× 109cfu/ml的施氏假单 胞菌和活菌数为2 ×109～3×109cfu/ml的侧孢芽孢杆菌 。 6.根据权利要求4所述的复合微生态制 剂的制备方法， 其特征在于： 制备辅助菌剂的混 合培养液的方法包括以下步骤： b1.将蜡样芽胞 杆菌、 反硝化细菌、 酵母菌分别接种于固体培 养基上进行活化； b2.挑取步骤b1中三种活化好的菌种的单菌落分别接种于各自的液体培养基上， 培养 条件为： 温度28～33℃； 转数180～200rpm， 培养10～18小时， 分别得到蜡样芽胞杆菌种子 液、 反硝化细菌种子液和酵母菌种子液； b3.步骤b2所得的蜡样芽胞杆菌菌液接种到发酵罐中， 培养8～10小时后， 再将步骤b2 所得的反硝化细菌和酵母菌的菌液接到所述 发酵罐中， 与蜡样 芽胞杆菌 混合培养2 4～36小 时， 得到辅助菌剂混合培 养液。 7.根据权利要求4或6所述的复合微生态制剂的制备方法， 其特征在于： 所述发酵罐含 有以下重量百分比的成分： 葡萄糖1.2％～3％、 玉米浆粉1.5％～2.5％、 酵母蛋白0.5％～ 1％、 大豆粉0.4％～0.8％、 玉米面0.1％～0.3％、 磷酸氢二钾0.1％～0.5％、 氯化钠0.02％ ～0.1％。 8.根据权利要求5或6所述的复合微生态制剂的制备方法， 其特征在于： 所述液体培养 基组成为蛋白胨2％～3％、 玉米粉0.5％～1％、 葡萄糖2％～3％、 磷酸二氢钠0.1％～ 0.3％、 硫酸镁0.03％～0.05％、 磷酸氢二钠0.05％～0.1％、 硫酸锰0.005％～0.008％、 碳权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114854644 A 2酸钙1％～1.5％、 其余为蒸馏水， 定容后调节pH值至7.5～7.8， 110～120℃高温高压灭菌30 ～40min。 9.一种基于权利要求1 ‑3任一项所述的复合微生态制剂的应用， 其特征在于： 将所述复 合微生态制剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于池塘上， 每周泼洒一次， 持续一 个月， 用于净化水产养殖的尾水。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114854644 A 3