(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210667076.4 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 孙文桃 地址 516000 广东省惠州市陈江金湖路西4 巷金意市场2层 (72)发明人 孙文桃　 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 3/00(2006.01) (54)发明名称 一种基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产 生菌培养方法 (57)摘要 本发明提供了一种基于生物纳米硒制备的 生物纳米硒产生菌培养方法， 运用于微生物领 域； 将生物纳米硒产生菌接种于预设的发酵培养 基中； 对所述发酵培养基通入二氧化碳， 使所述 生物纳米硒产生菌适应无氧环 境， 对所述生物纳 米硒产生菌进行厌氧培养； 选用碳源作为培养液 进行培养， 滴入所述培养液后等待预设时间， 直 至所述生物纳米硒产生菌出现生长变化； 判断所 述生长变化是否匹配预设的菌株变化情况； 其 中， 所述预设的菌株变化情况包括菌株分裂； 若 是， 则所述生物纳米硒产生菌培养完成； 本发明 通过使生物纳米硒产生菌的生长变化匹配生物 纳米硒产生菌的菌株变化情况， 令生物纳米硒产 生菌的合 成时间缩短， 有效提高了生物纳米硒产 生菌的合成纯度。 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 CN 115029263 A 2022.09.09 CN 115029263 A 1.一种基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： S1： 将生物纳米硒产生菌 接种于预设的发酵培 养基中； S2： 对所述发酵培养基通入二氧化碳， 使所述生物纳米硒产生菌适应无氧环境， 对所述 生物纳米硒产生菌进行厌氧培 养； S3： 选用碳源作为培养液进行培养， 滴入所述培养液后等待预设时间， 直至所述生物纳 米硒产生菌出现生长变化； 其中， 所述 生长变化包括发酵初期、 发酵中期和发酵末期； S4： 判断所述生长变化是否匹配预设的菌株变化情况； 其中， 所述预设的菌株变化情况 包括菌株分裂； S5： 若是， 则所述 生物纳米硒产生菌 培养完成。 2.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述将生物纳米硒产生菌 接种于预设的发酵培 养基中的步骤中， 包括： 所述发酵培养基由无机盐、 氮源、 原材料和蛋白胨组成； 其中碳源营养成分为葡萄糖、 蔗糖、 淀粉糖浆中的一种或几种； 其中， 所述无机盐 的成分设定为10 ‑50g， 所述氮源的成分 设定为1‑8g， 所述原材 料设定为3 00‑500g， 所述蛋白胨设定为10 0‑500g。 3.根据权利要求2所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述原材料选定为酵母提取粉、 酵母浸膏或大豆卵磷脂中的任意一种； 所述蛋白胨选 定为多价蛋白胨、 胰蛋白胨或月示蛋白胨中的任意 一种。 4.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述对所述 生物纳米硒产生菌进行厌氧培 养的步骤中， 包括： 将中和氧气的气体放置入所述发酵培养基中； 其中， 所述中和氧气的气体包括氢气、 氮 气或氩气中的任意 一种； 采用预设的去氧分子配合所述中和氧气的气体， 进行3 ‑6h的中和除氧， 使所述生物纳 米硒产生菌通过呼吸消耗掉氧气； 其中， 所述去氧分子包括黄磷、 金属铬或稀硫酸中的任意 一种。 5.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述选用碳源作为培 养液进行培 养的步骤中， 包括： 所述碳源采用有机酸、 有机酸酯或小分子醇中的任意 一种。 6.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述滴入所述培养液后等待预设时间， 直至所述生物纳米硒产生菌出现生长变化的 步骤中还 包括： 根据预设的生物纳米硒产生菌的菌株需求量， 对应滴入与所述菌株需求量比例为1： 4 的培养液含量， 并根据所述生物纳米硒产生菌的预设菌种， 为所述生物纳米硒产生菌配置 对应的水种； 其中， 所述预设菌种包括淡水种细菌和海水种细菌， 所述水种包括蒸馏水、 自 来水或海水的任意 一种。 7.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述 滴入所述培 养液后等待预设时间的步骤中， 包括： 所述预设时间根据所述生物纳米硒产生菌的菌种设定对应的时间； 其中， 所述对应的 时间包括10 ‑15h和12‑18h。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115029263 A 28.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述将生物纳米硒产生菌 接种于预设的发酵培 养基中的步骤中， 还 包括： 将所述发酵培养基移动到可受到光照的环境下， 并保证所述发酵培养基保持在恒温状 态； 其中， 所述恒温状态设定为 40‑50℃。 9.根据权利要求1所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述判断所述 生长变化是否匹配预设的菌株 变化情况的步骤中， 包括： 获取所述生物纳米硒产生菌的原生菌种量； 判断所述原生菌种量是否小于预设的菌株分裂量； 若是， 则所述生物纳米硒产生菌处于菌株分裂的发酵初期； 若否， 则所述生物纳米硒产 生菌处于 菌株死亡的发酵后期。 10.根据权利要求9所述的基于生物纳米硒制备的生物纳米硒产生菌培养方法， 其特征 在于， 所述则所述 生物纳米硒产生菌处于 菌株死亡的发酵后期的步骤后， 包括： 将预设的生长促进剂注入所述发酵培养基， 待所述生长促进剂的分子稀释在所述发酵 培养基的无氧环境中， 被所述生物纳米硒产生菌通过呼吸进 行吸收； 其中， 所述生长促进剂 选用Fe2+、 Mg2+、 K+、 Ca2+中的任意 一种阳离 子。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115029263 A 3