(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210694266.5 (22)申请日 2022.06.20 (71)申请人 硒惠农生物科技 （深圳） 有限公司 地址 518000 广东省深圳市宝安区新 安街 道大浪社区裕安二路178-2号普威酒 店103 (72)发明人 余祥海　 (74)专利代理 机构 深圳市致 开百诺鑫知识产权 代理事务所 (普通合伙) 44888 专利代理师 赫坤鹏 (51)Int.Cl. C12P 3/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒 的制备方法 (57)摘要 本发明提供了一种基于特定乳酸菌制备红 色生物纳米硒的制备方法， 应用于微生物技术领 域； 活化， 用预设的发酵培养基对纳米硒菌株进 行活化培养， 以培养得到生物纳米硒菌株， 发酵 培养基的培养配方为： 树脂， 燕麦片， 葡萄糖， 酸 水解酪蛋白， 碳酸钙， 硝酸， 硫酸镁； 培养， 将预设 的特定乳酸菌作为培养液对生物纳米硒菌株进 行培养； 代谢， 将亚硒酸钠溶液加入菌株培养液 中进行预设时间段的代谢， 生 成红色生物纳米硒 溶液； 收集， 将红色生物纳米硒溶液利用超声波 破碎仪对溶液的残留菌体进行离心破碎， 得到残 留菌体分离的上清液， 上清液即为红色生物纳米 硒初提物； 提纯， 从红色生物纳米硒初提物中进 行分离纯化， 得到红色生物纳米硒。 权利要求书2页 说明书7页 附图1页 CN 114774475 A 2022.07.22 CN 114774475 A 1.一种基于特定 乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1： 活化， 用预设的发酵培养基对纳米硒 菌株进行活化培养， 以培养得到生物纳米硒菌 株， 其中， 所述发酵培养基的培养配方为： 树脂20 ‑30g/L， 燕麦片5 ‑10g/L， 葡萄糖0.1 ‑2.5g/ L， 酸水解酪蛋白0.1 ‑1.0g/L， 碳 酸钙0.5‑2.5g/L， 硝酸0.75 ‑1.5g/L， 硫酸镁0.75 ‑2g/L； S2： 培养， 将预设的特定乳酸菌作为培养液对所述生物纳米硒菌株进行预设时间段和 预设温度区间的培 养； S3： 代谢， 将预设浓度的亚硒酸钠溶液加入菌株培养液中进行预设时间段的代谢， 生成 红色生物纳米硒溶 液； S4： 收集， 将所述红色生物纳米硒溶液利用超声波破碎仪对溶液的残留菌体进行预设 时间的离心破碎， 得到所述残留菌体分离的上清液， 所述上清液即为红色生物纳米硒初提 物； S5： 提纯， 从所述红色生物纳米硒初提物中进行分离纯化， 得到红色生物纳米硒。 2.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述特定 乳酸菌的制备步骤 包括： 将预设的乳酸菌 接种于预设的发酵培 养基中； 对所述发酵培养基通入二氧化碳， 使所述乳酸菌适应无氧环境， 对所述乳酸菌进行厌 氧培养； 利用优选培养液对所述乳酸菌进行培养， 注入所述培养液后静置3 ‑6小时， 直至所述乳 酸菌出现生长变化， 以得到特定 乳酸菌。 3.根据权利要求2所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述利用优选的培养液对 所述乳酸菌进行培养，  注入所述培养液后等待3 ‑6小时， 直至 所述特定 乳酸菌出现生长变化， 以得到所述特定 乳酸菌的步骤中， 包括： 所述生长变化具体包括菌株分裂或菌株增大。 4.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述将预设的特定乳酸菌作为培养液对所述生物纳米硒菌株进行预设时间段和预设温 度区间的培 养的步骤S2中， 包括： 所述恒温培 养的温度设定为2 ‑6℃， 恒温培 养的时间设定为6 ‑12小时。 5.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述将预设浓度的亚硒酸钠溶液加入菌株培养液中进行预设时间段的代谢， 生成红色 生物纳米硒溶 液的步骤S3中， 包括： 所述预设时间段的代谢， 具体代谢的时间设定为3 ‑5h。 6.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述将预设浓度的亚硒酸钠溶液加入菌株培养液中进行预设时间段的代谢， 生成红色 生物纳米硒溶 液的步骤S3中， 包括： 采用含硒45%的亚硒酸钠加入82℃的热水中， 经过5分钟完全溶解后得到所述亚硒酸钠 溶液； 所述亚硒酸钠溶 液的浓度为91.4mo l/L。 7.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述将所述红色生物纳米硒溶液利用超声波破碎仪对溶液的残留菌体进 行预设时间的 离心破碎， 得到所述残留菌体分离的上清液， 所述上清液即为红色生物纳米硒初提物的步权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114774475 A 2骤S4中， 包括： 所述超声 波破碎仪的破碎 功率设定为10 0‑150w。 8.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述将所述红色生物纳米硒溶液利用超声波破碎仪对溶液的残留菌体进 行预设时间的 离心破碎， 得到所述残留菌体分离的上清液， 所述上清液即为红色生物纳米硒初提物的步 骤S4中， 包括： 所述预设时间段的离心破碎， 具体离心时间设定为5 ‑10分钟。 9.根据权利要求1所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述从所述红色生物纳米硒 初提物中进 行分离纯化， 得到红色生物纳米硒的步骤S 5中， 包括： 采用预设的纯化装置对所述红色生物纳米硒溶液对应的待提取物质进行提取； 所述纯 化装置包括萃 取塔； 所述待提取物质具体包括红色生物纳米硒的沉淀物质或特定乳酸菌的 菌群。 10.根据权利要求9所述的基于特定乳酸菌制备红色生物纳米硒的制备方法， 其特征在 于， 所述采用预设的纯化装置对所述红色生物纳米硒溶液对应的待提取物质进行提取的步 骤中， 包括： 根据所述红色生物纳米硒的具体溶液量， 加入正己烷进行萃取， 得到萃取完毕的红色 生物纳米硒； 所述 正己烷的加入量与所述红色生物纳米硒溶 液量的比例为1： 5； 将所述萃取完毕的红色生物纳米硒进行冷冻干燥， 得到分离纯化的红色生物纳米硒； 所述冷冻干燥的时间设定为3 0min。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114774475 A 3