(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210786975.6 (22)申请日 2022.07.04 (71)申请人 浙江大学杭州国际科创中心 地址 310000 浙江省杭州市萧 山区市心北 路99号5楼 (72)发明人 马斌　余静文　 (74)专利代理 机构 长沙都创云天知识产权代理 事务所(普通 合伙) 43274 专利代理师 夏轩 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) (54)发明名称 一种培养细菌新物种的培 养基制作方法 (57)摘要 本发明涉及微生物领域， 尤其涉及一种培养 细菌新物种的培养基制作方法， 所述方法基于微 生物初始资源库， 获得生物因子， 用以培养细菌； 基于高通量测序方法， 获得微生物群落结构特 征， 并基于所述微生群落结构特征和所述生物因 子， 配置目标培养基； 基于 所述目标培养基， 培养 活性单细胞， 获得新物种菌落。 本发明通过在培 养基中增加了微生物生长所需的生物因子， 提高 了培养效率； 避免了传统培养方法中富养条件对 微生物的选择和共培养中微生物竞争造成的物 种多样性损失； 通过高通量测序数据指导培养基 的配制， 结合微生物信息学和培养组学， 提高了 培养基的可靠性， 解决了目前微生物培养效率低 下的技术问题。 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 CN 115074289 A 2022.09.20 CN 115074289 A 1.一种培 养细菌新物种的培 养基制作方法， 其特 征在于， 所述方法包括： 基于微生物初始资源库， 获得生物因子， 用以培 养细菌； 基于高通量测序方法， 获得微生物群落结构特征， 并基于所述微生群落结构特征和所 述生物因子， 配置目标培 养基； 基于所述目标培 养基， 培养活性单细胞， 获得新物种菌落。 2.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述基于微 生物初始资源库， 获得生物因子， 用以培 养细菌， 包括： 基于微生物初始资源库， 获取已知 细菌； 基于液体培 养基， 培养所述已知 细菌， 并在对数期结束培 养， 获得培 养液； 过滤所述培养液中的所述已知 细菌， 获得 所述生物因子， 用以培 养细菌。 3.根据权利要求2所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述生物 因 子包括代谢物、 分泌物和酶。 4.根据权利要求2所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述过滤所 述培养液中的所述已知 细菌， 获得 所述生物因子， 包括： 用孔径小于0.22um的无菌滤膜过滤所述培养液中的所述已知细菌， 获得所述生物因 子。 5.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述基于所 述微生群落结构特 征和所述 生物因子， 配置目标培 养基， 包括： 基于所述 微生物群落结构特 征， 确定所述 生物因子的配置比例； 基于所述配置比例， 配置所述 生物因子； 稀释所述 生物因子， 获得目标培 养基， 以培 养所述活性单细胞。 6.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述基于所 述目标培 养基， 培养活性单细胞， 获得新物种菌落， 包括： 基于流式细胞仪和细胞培 养板， 对所述活性单细胞进行分选， 获得分选细胞板； 在所述分选细胞板的培养仓中加入所述目标培养基， 并基于半透膜， 对所述培养仓进 行分隔密封； 基于预设培养参数， 将所述分选细胞板放入恒温恒湿培养箱中进行培养， 以获得所述 新物种菌落。 7.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述基于预 设培养参数， 将所述分选细胞板放入恒温恒湿培养箱中进行培养， 以获得所述新物种菌落， 包括： 基于预设培 养时长， 获取 所述细胞培 养板中的可 见菌落； 通过对所述可 见菌落的接种培 养和纯化， 获得 所述新物种菌落。 8.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述基于流 式细胞仪和细胞培 养板， 对所述活性单细胞进行分选， 包括： 基于流式细胞仪的荧 光分选能力， 筛 选待选微 生物中的所述活性单细胞； 基于所述 流式细胞仪， 将所述活性单细胞分选 至所述细胞培 养板的培养仓中。 9.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作 方法， 其特征在于， 所述半透膜 为聚四氟乙烯 膜。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115074289 A 210.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作方法， 其特征在于， 所述基于 所述目标培 养基， 培养活性单细胞， 获得新物种菌落之后， 还 包括： 将所述新物种菌落添加到所述 微生物初始资源库中， 以循环培 养所述新物种菌落。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115074289 A 3