(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221084646 0.0 (22)申请日 2022.07.19 (83)生物保 藏信息 KACC 22163 2021.0 3.08 (71)申请人 山东大湖新材 料有限公司 地址 250000 山东省济南市天桥区桑梓店 舜兴路988号济南大学科技园2号楼 东 单元408室 (72)发明人 邵明伟　贾保磊　阮文婷　田差沃　 (74)专利代理 机构 北京瑞盛铭杰知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11617 专利代理师 李绩 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C02F 3/34(2006.01)C12R 1/01(2006.01) C02F 103/20(2006.01) (54)发明名称 一种嗜盐微 生物污水清洗剂及其制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种嗜盐微生物污水清洗剂及 其制备方法， 涉及微生物发酵及污水处理领域。 该方法包括:将从韩国黄海中分离得到嗜盐微生 物进行菌株液体培养 ,在温度条件为30℃ , pH7.0、 3％盐浓度下培养24小时。 取菌培 上清液, 加入混合有机溶剂进行沉淀。 对沉淀物冷冻真空 干燥， 将干燥后的固体进行粉碎研磨,获粒径为 200nm‑100μm的嗜盐微生物清洗剂。 本发明制备 的嗜盐微生物清洗剂具有高效地生物降解能力, 具有良好的经济和环保效益,对污水中存在的动 物排泄物进行无害化处理， 并且处理过程中不会 产生二次污染。 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 115232766 A 2022.10.25 CN 115232766 A 1.一种清洁污水的黄海鞘氨醇杆状菌(Sphingorhabdus  sp.)菌株M375， 其特征在于， 保藏中心登记入册编号 为KACC 22163。 2.权利要求1所述M375的培养方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 将所述M375于培养液 中振荡培 养24～36h； 所述培养液包括以下浓度的成分： 氯化钠19.45g/L、 硼酸三月桂酯0.02g、 氯化镁8.8g/ L、 蛋白胨5.0g/L、 Na2SO3 3.24g/L、 CaCl2 1.8g/L、 硅酸钠4.0mg/L、 酵母提取物1.0g、 氯化钾 0.55g/L、 硝酸铵1.6mg/L、 碳酸氢钠0.16g/L、 磷酸氢二钠8.0mg/L、 柠檬酸铁0.1g/L、 溴化钾 0.08g/L、 二氯化锶0.0 3g/L和氟化钠2.4mg/L， pH7.0 ±0.3。 3.根据权利要求2所述培养方法， 其特征在于， 所述振荡培养的温度为30℃， 摇床转速 为160rpm。 4.一种黄海鞘氨醇杆状菌清洗剂， 其特征在于， 包括权利要求1所述M375的培养上清液 和有机溶剂。 5.根据权利要求4所述清洗剂， 其特征在于， 所述有机溶剂包括无水乙醇和异丙醇； 所 述无水乙醇和异丙醇的体积比为10： 1。 6.根据权利要求4所述清洗剂， 其特征在于， 所述培养上清液和有机溶剂的体积比为1： 2。 7.权利要求4～6任一项所述清洗剂的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 将权利要 求2或3所述培 养方法得到的菌 培液， 8000g离心15分钟， 收集上清液； 将所述上清液与有机溶剂进行混合， 4℃放置过夜， 再经过10000g  10min离心后弃上 清。 8.根据权利要求7所述制备方法， 其特征在于， 在弃上清后， 还包括对沉淀物置于冻干 机内冻干， 将冻干后的固体进行粉碎研磨， 制成为粒径200nm ‑100 μm的纯品嗜盐微生物清洗 剂。 9.权利要求4～6任一项所述清洗剂在去除污水废水中的畜禽粪便并且有效消除污水 中的异味中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115232766 A 2一种嗜盐微生物污水清洗剂及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 一种嗜盐微生物污水清洗剂及 其制备方法， 涉及微生物发酵及污水处 理领域。 背景技术 [0002]众所周知， 家禽、 畜牧业等中大型养殖场每天排放大量的废水,并且废水中含有较 多的污染物， 例如畜禽粪便， 畜禽药物残留， 畜禽病原体等。 如果没有 经过污水 处理， 直接排 放畜牧养殖废水将造成严重的生态环境污染， 同时废水被再次利用与农田或生活领域将形 成更为严峻的农田污染或危害。 同时， 一些大型纺织厂， 污水 处理厂等工厂排放废水时伴随 严重的污水异味， 严重影响周围环境和 生活活动。 污染废水中伴 随产生的异味主要是 由一 些硫化合物或者氮 化合物等物质产生， 且是强烈刺激性的异味， 可通过不同途径进入人体， 如呼吸道、 眼睛、 皮肤等,使人头晕不舒服， 长时间放置， 对人体神经系统会产生严重的影 响。 [0003]目前已经发现的自然生物处理法是一种利用天然的水体和土壤中的微生物来净 化废水的方法,亦称,主要有水体净化和土壤净化两种。 在有氧化塘、 养殖塘和土地处理等 领域受到了广泛的应用。 虽然自然生物处理法费用低， 对一些难生化降解的有机物、 氮磷等 营养物和细菌的有较为明显的去除功效。 但建立自然生物处理基地占地面积大且其处理效 率易受季节等因素的影响。 [0004]微生物污水清洗剂是通过微生物菌株发酵过程中产生具有除污活性功能的代谢 产物组成,其主要功能的生物大分子具有良好的生物降解能力， 并且 无毒， 可有效去除生活 污水中的悬浮物BOD和COD。 目前， 未见有关本发明所用嗜盐微生物菌种(Sphingorhabdus   sp.M375)生产微生物清洗剂的相关报道,且在专利检索中未发现微生物清洗剂在高盐浓度 (1‑12％NaCl)情况 下使用的专利。 发明内容 [0005]本发明的目的旨在提供一种利用嗜盐微生物菌种发酵后的菌液进行污水处理清 洗剂功效的制备方法， 该方法具有良好的生物降解能力， 成本低廉的且绿色无污染， 有效去 除污水中的悬浮物， BOD和COD， 尤其对畜禽粪便具有明显功效。 [0006]黄海鞘氨醇杆状菌为(Sphingorhabdus  sp.M375):革兰氏阳性菌， 菌落成凸起且 有光泽的乳白色状， 可通过鞭毛带动运动。 该菌株可以在NaCl浓度为1 ‑17％(w/v)(最佳， 3％)， 温度为10 ‑40℃(最佳， 30℃)和pH6.0 ‑11.0(最佳， pH7.0)的环境条件下生长。 具有氧 化酶和过氧化氢酶阳性活性。 具有七叶皂苷水解， 硝酸盐还原 为亚硝酸盐的能力。 由d ‑葡萄 糖， l‑阿拉伯糖(弱)， d ‑甘露糖(弱)， d ‑甘露醇， N ‑乙酰葡糖胺(弱)， 麦芽糖， 葡萄糖酸钾， 己 二酸， 苹果酸和柠檬酸三钠产生酸。 酯酶(C4)， 亮氨 酸芳基酰胺酶， 缬氨酸芳基酰胺酶， 酸性 磷酸酶(弱)， 碱性磷酸 酶(弱)， 萘酚作为双水解 酶和α‑葡萄糖苷酶的活性均为阳性。 该型菌 株在基因 组DNA中具有5 5.4mol％G+C的含量。说　明　书 1/3 页 3 CN 115232766 A 3