(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210963045.3 (22)申请日 2022.08.11 (71)申请人 通辽梅花生物科技有限公司 地址 028024 内蒙古自治区通辽市科尔沁 区木里图工业园区 (72)发明人 王晓平　宫卫波　马新悦　高鹏　 李岩　吴强　鲁振如　 (74)专利代理 机构 内蒙古欣洋 瑞专利代理有限 公司 151 10 专利代理师 刘彩霞 (51)Int.Cl. C12P 13/08(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 一种制备L-苏氨酸的半连续发酵方法及其 糖蜜营养液 (57)摘要 本发明公开了一种制备L ‑苏氨酸的半连续 发酵方法及其糖蜜营养液， 半连续发酵方法是将 发酵菌种经种子培养后得到种子液； 将种子液按 比例接种至发酵培养基中发酵培养， 发酵培养过 程中至少进行1次放料， 每次放料结束后， 调整补 糖速率控制残糖≤2.0g/L， 同时以10 ‑16.5g/L/h 补加糖蜜营养 液， 直至发酵结束， 进行最终放料。 糖蜜营养液按如下步骤制备： (1)稀释糖蜜得到 糖蜜稀释液； (2)糖蜜稀释液脱色； (3)脱色液酸 化； (4)酸化液水解； (5)水解液二次稀释； (6)配 制糖蜜营养 液。 利用本发 明发酵方法制备L ‑苏氨 酸， 能够提高发酵效率， 提高糖酸 转化率。 权利要求书2页 说明书9页 附图3页 CN 115181764 A 2022.10.14 CN 115181764 A 1.一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 将发酵菌种经种子培养后得到 种子液； 将种子液按比例接种至发酵培养基中发酵培养， 发酵培养过程中至少进行1次放 料； 每次放料结束后， 调整补糖速率控制残糖≤2.0g/L， 同时以10 ‑16.5g/L/h补加糖蜜营养 液； 直至发酵 结束， 进行最终放料。 2.根据权利要求1所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 在进行第 一次放料之前的发酵培 养过程中， 控制残糖≤ 0.5g/L。 3.根据权利要求1所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 每次放料 时， 细菌生长 至少达到稳定期后进行放料， 放料终点 为初始发酵体积的1 ‑1.2倍。 4.根据权利要求1所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 二级种子 液按1:7‑1:10的体积比接种至发酵培 养基。 5.根据权利要求1所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 所述发酵 菌种为大肠杆菌或谷氨酸 棒状杆菌 。 6.根据权利要求1 ‑5任一所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 所 述发酵培养基包括： 葡萄糖30g/L， 硫酸铵10g/L， 玉米浆6g/L， 甜菜碱盐酸盐2.0g/L， KH2PO4  0.5g/L， MgSO4·7H2O 0.5g/L， F eSO4·7H2O 0.01g/L， MnSO4·H2O 0.01g/L。 7.根据权利要求1 ‑5任一所述的一种制备L ‑苏氨酸的半连续发酵方法， 其特征在于， 所 述糖蜜营养液按如下步骤制备： (1)稀释糖蜜得到糖蜜稀释液； (2)糖蜜稀释液脱色； (3)脱 色液酸化； (4)酸 化液水解； (5)水解液二次稀释； (6)配制糖蜜营养液； 其中 (1)稀释糖蜜得到糖蜜稀释液： 向糖蜜中加入3 ‑5倍质量的水混合均匀后制备得到糖蜜 稀释液； (2)糖蜜稀释液脱色： 向所述糖蜜稀释液中添加木质活性炭， 添加所述木质活性炭的质 量为所述糖蜜稀释液质量的1.5％ ‑3％， 搅拌、 过 滤得到脱色液； (3)脱色液酸化： 向所述脱色液中加入盐酸或稀硫酸或磷酸， 使得酸的终质量百分比浓 度为10％ ‑20％， 得到酸 化液； (4)酸化液水解： 将所述 酸化液加热至 50‑70℃水解， 制得 水解液； (5)水解液二次稀释： 向所述水解液中加入水， 使得酸的终质量百分比浓度为1.0 ％， 得 到稀释水解液； (6)配制糖蜜营养液： 向所述稀释水解液中加入甜菜碱盐酸盐或甜菜碱磷酸盐得到糖 蜜营养液， 所述糖蜜营养液中甜菜碱盐酸盐或甜菜碱磷酸盐的浓度为3.0g/L。 8.一种用于生产L ‑苏氨酸的糖蜜营养液的制备方法， 其特征在于， 其包括如下步骤： (1)稀释糖蜜得到糖蜜稀释液； (2)糖蜜稀释液脱色； (3)脱色液酸化； (4)酸化液水解； (5)水 解液二次稀释； (6)配制糖蜜营养液； 其中 (1)稀释糖蜜得到糖蜜稀释液： 向糖蜜中加入3 ‑5倍质量的水混合均匀后制备得到糖蜜 稀释液； (2)糖蜜稀释液脱色： 向所述糖蜜稀释液中添加木质活性炭， 添加所述木质活性炭的质 量为所述糖蜜稀释液质量的1.5％ ‑3％， 搅拌、 过 滤得到脱色液； (3)脱色液酸化： 向所述脱色液中加入盐酸或稀硫酸或磷酸， 使得酸的终质量百分比浓 度为10％ ‑20％， 得到酸 化液； (4)酸化液水解： 将所述 酸化液加热至 50‑70℃水解， 制得 水解液；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115181764 A 2(5)水解液二次稀释： 向所述水解液中加入水， 使得酸的终质量百分比浓度为1.0 ％， 得 到稀释水解液； (6)配制糖蜜营养液： 向所述稀释水解液中加入甜菜碱盐酸盐或甜菜碱磷酸盐得到糖 蜜营养液， 所述糖蜜营养液中甜菜碱盐酸盐或甜菜碱磷酸盐的浓度为3.0g/L。 9.利用权利要求8所述方法制备 得到的糖蜜营养液。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115181764 A 3