(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210973187.8 (22)申请日 2022.08.15 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M 202 21039 2022.07.06 (71)申请人 江南大学 地址 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大 道1800号 申请人 江南大学 （绍兴） 产业 技术研究院 (72)发明人 毛健　刘双平　马东林　刘彩霞　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权 代理有限公司 2321 1 专利代理师 赵巧娜 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12G 3/022(2019.01)C12G 3/021(2019.01) C12J 1/04(2006.01) A23L 27/50(2016.01) A23L 29/00(2016.01) A23L 27/24(2016.01) A23L 19/00(2016.01) A23L 11/50(2021.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株高产糖化酶和液化酶的玫瑰糖多孢菌 菌株及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株高产糖化酶和液化酶的 玫瑰糖多孢菌菌株及其应用， 属于发酵工程与生 物技术领域。 本发明通过常温常压等离子诱变筛 选得到了高产糖化酶和液化酶的玫瑰糖多孢菌 A22， 其糖化酶活力为1372.85U/g ±55.54U/g， 液 化酶活力为1.53U/g ±0.09U/g， 相比原始菌株， 糖化酶活力提升了29％， 液化酶活力提升了 47％。 本发明中利用高产酶的诱变菌株A22制备 的接种生麦曲， 是对传统生麦曲的一种强化， 可 以用于生产白酒、 黄酒、 米酒、 料 酒、 酱油、 醋等各 类曲法制得的酿造食品， 在曲法酿造的食品中具 有广泛的应用前 景。 权利要求书1页 说明书14页 附图2页 CN 115161246 A 2022.10.11 CN 115161246 A 1.一株玫瑰糖多孢菌(Saccharop olyspora  rosea)A22， 已于2022年7月6日保藏于中国 典型培养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO:M 20221039。 2.一种微生物菌剂， 其特征在于， 含有权利要求1所述的玫瑰糖多孢菌A22或其发酵液， 或含有权利要求1所述的玫瑰糖多孢菌A 22细胞裂解液。 3.根据权利要求2所述的微生物菌剂， 其特征在于， 所述微生物菌剂中， 玫瑰糖多孢菌 A22的含量至少为1.0 ×106spore/mL。 4.一种生麦曲， 其特征在于， 所述生麦曲为， 将小麦粉碎， 将权利要求1所述玫瑰糖多孢 菌A22菌悬液按照一定的添加量加 到粉碎的小麦中， 搅拌均匀， 在曲房发酵6 ‑7d， 制备得到 生麦曲。 5.根据权利要求4所述的生麦曲， 其特征在于， 所述玫瑰糖多孢菌A22菌悬液的浓度为 104～108CFU/mL， 将玫瑰糖多孢菌A22菌悬液按照20％～26％的添加量接种到粉碎的小麦 中， 搅拌均匀后进行发酵。 6.权利要求1所述的玫瑰糖多孢菌A22或权利要求2或3所述的微生物菌剂或权利要求4 或5所述的生麦曲在制备发酵食品中的应用。 7.如权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述发酵食品包括但不 限于酒精饮料、 豆制 品、 发酵蔬菜、 调味品。 8.权利要求1所述的玫瑰糖多孢菌A22或权利要求2所述的微生物菌剂在提高生麦曲的 糖化力和液化力中的应用。 9.权利要求1所述的玫瑰糖多孢菌A22或权利要求2所述的微生物菌剂或权利要求4或5 所述的生麦曲在提高黄酒酒精度、 或在降低黄酒中高级醇含量、 或在降低黄酒中苦味氨基 酸含量中的应用。 10.一种酒的酿造方法， 其特征在于， 将权利要求4或5所述的发酵剂直接添加至含有酒 母的原料中进行发酵制备 得到； 所述酒包括但不限于 黄酒、 白酒、 清酒、 米酒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161246 A 2一株高产糖化酶和液化酶的玫瑰糖多孢 菌菌株及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 一株高产糖化酶和液化酶的玫瑰糖多孢菌菌株及其应用， 属于发酵工 程与生物技 术领域。 背景技术 [0002]生麦曲是我国传统酿造食品中最常见的糖化剂之一， 不仅起到提供糖化酶与液化 酶的作用， 对发酵物(一般是酒类)的风味特征也有显著影响。 生麦曲为发酵食品提供各种 酶类， 主要是淀粉酶、 蛋白酶、 脂肪酶等， 促使原料所含的淀粉、 蛋白质、 脂肪等高分子物质 的液化、 分解， 同时在制曲过程中形成的各种代谢物， 以及由这些代谢产 物相互作用产生的 色泽、 香味等物质， 赋予酿造食品独特的风格。 生麦曲中的淀粉酶对酿造食品中原料的利用 起着至关重要的作用， 而水解淀粉的两个关键酶是糖化酶和液化酶， 因此生麦曲中的糖化 酶和液化酶也是表征麦曲质量的关键指标。 [0003]宏基因组测 序证实糖多孢菌是黄酒麦曲和发酵过程中的核心微生物， 尤其麦曲中 的披发糖多孢菌、 霍氏糖多孢菌、 玫瑰糖多孢菌和江西糖多孢菌在放线菌属中占有主要的 丰度。 功能预测也表明糖多孢菌属与食品发酵过程中的风味物质联系紧密， 主要与氨基酸 (天冬氨酸、 苏氨 酸或甲硫氨 酸)脂肪酸的来源(辛酸、 癸酸、 月桂酸)， 和醇类、 酯类物质合 成 有关。 因此提高麦曲中糖多孢菌属的丰度对于改善发酵食品的风味和质量具有重要的意 义。 [0004]目前， 现有生麦曲的生产主要利用环境种的微生物， 属于开放培养， 曲中优良菌种 少， 酶活力较低， 导致酿造时用曲量大， 增加企业生产成本， 另外， 生产中麦曲用量过大， 容 易导致酿造食品风味变差， 色泽偏暗， 进而影响酿造食品品质。 实验室前期 筛选了一株可以 进行生麦曲制作的玫瑰糖多孢菌， 但是它存在水解淀粉酶活低， 原料利用率低等 缺点。 [0005]同时， 采用现有工艺酿造的黄酒高级醇的含量较高(560mg/L ‑620mg/L)， 会导致饮 后头晕， 恶心等不良反应， 因此在黄酒发酵过程中要控制高级醇的含量。 此外， 现有工艺酿 造的黄酒由于添加了熟麦曲， 熟麦曲具有较高的蛋白酶， 可以水解原料产生大量的氨基酸， 包括一些苦味氨基酸(2.5g/L ‑3g/L)， 这也是导致黄酒苦涩 重的主要原因。 目前黄酒企业酿 造的黄酒酒精度普遍在17％vol ‑18％vol之间， 要开发一种新型麦曲去替代传统麦曲， 首先 酒精度要接 近原有工厂的酒精度。 [0006]因此， 针对上述目前黄酒企业存在的问题， 选育出高产淀粉酶， 遗传稳定性好的菌 株， 并将其接种到生麦曲中， 对改善黄酒的风味， 以及提高其他酿造食品原料的利用率上具 有重要意 义。 发明内容 [0007]本发明提供了一株玫瑰糖多孢菌(Saccharopolyspora  rosea)A22， 已于2022年7 月6日保藏于中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO:M 20221039。 [0008]所述玫瑰糖多孢菌(Saccharopolyspor a rosea)A22是对玫瑰糖多孢菌原始菌株说　明　书 1/14 页 3 CN 115161246 A 3