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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221082380 0.8 (22)申请日 2022.07.14 (83)生物保 藏信息 CCTCC No: M 2022205 2022.03.07 (71)申请人 湖南农业大 学 地址 410128 湖南省长 沙市芙蓉区农大路1 号 (72)发明人 黄国华 陈琪 易思佳 王星 (74)专利代理 机构 北京知文通达知识产权代理 事务所(普通 合伙) 16051 专利代理师 欧阳石文 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/23(2020.01) A01P 7/04(2006.01)C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株苏云金芽孢杆菌B172及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株苏云金芽孢杆菌B172及 其应用, 该菌株 保藏于中国典型培养物保藏中心 (CCTCC) , 保藏日期是2022年3月7日, 保藏编号为 CCTCC No: M 2022205。 该菌株对夜蛾 科害虫具有 高效、 特异和稳定的杀虫活性, 通过胃毒活性有 效杀灭夜蛾科幼虫, 且具有制备成本低、 环境污 染低等优势, 具有开发为生物防治剂用于治理夜 蛾科虫害的潜力, 满足我国对害虫绿色可持续综 合防控的重要需求。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115369057 A 2022.11.22 CN 115369057 A 1.一株苏云金芽孢杆菌 ( Bacillus thuringiensis ) B172, 保藏于中国典型培养物保藏 中心, 保藏编号 为CCTCC No: M 2022205。 2.如权利要求1所述的一株苏云金芽孢杆菌在夜蛾科害虫防治中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用, 其特征在于, 所述夜蛾科害虫选自甜菜夜蛾、 斜纹夜蛾、 草地贪夜蛾、 棉铃虫和粘虫中的至少一种。 4.根据权利要求3所述的应用, 其特征在于, 所述夜蛾科害虫选自棉铃虫和粘虫中的至 少一种。 5.一种防治夜蛾科害虫的生物杀虫剂, 其是以如权利要求1所述苏云金芽孢杆菌B172 作为活性成分。 6.如权利要求5所述的生物杀虫剂, 其特征在于, 其是培养液发酵所述苏云金芽孢杆菌 B172, 离心后去上清液, 获得的固体残留物即孢晶混合物。 7.如权利要求6所述的生物杀虫剂, 其特征在于, 培养液发酵培养3天, 在8000 rpm/min 的离心机上离心4 min, 去掉上清液获得固体残留物即孢晶混合物。 8.根据权利要求6或7所述的生物杀虫剂, 其特征在于, 所述生物杀虫剂的剂型为悬浮 剂、 油悬剂、 粉剂、 可湿性粉剂和颗粒剂中的至少一种。 9.根据权利要求6或7所述的应用, 其特征在于, 所述夜蛾科害虫选自甜菜夜蛾、 斜纹夜 蛾、 草地贪夜蛾、 棉铃虫和粘虫中的至少一种。 10.根据权利要求8所述的应用, 其特征在于, 所述夜蛾科害虫选自棉铃虫和粘虫中的 至少一种。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115369057 A 2一株苏云金芽孢杆菌 B172及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及一株苏云金芽孢杆菌 ( Bacillus thuringiensis ) B172及其应用, 属于 微生物和生物防治领域。 背景技术 [0002]夜蛾科 (Noctuidae) 隶属于鳞翅目 (Lepidoptera) 夜蛾总科 (Noctuoidea) , 广泛分 布在亚洲、 欧洲、 非洲和大洋洲等地区, 是鳞翅目中物种数量最多的一个科, 包含多种对农 业生产具有极大破坏性的重大害 虫, 如甜菜夜蛾、 斜纹夜蛾、 草地贪夜蛾、 棉铃虫和粘虫等。 此科昆虫大多具有食性杂、 食量大、 繁殖速度快、 迁飞性强等特点, 已给人类生产和生活密 切相关的水稻、 小麦、 玉米、 高粱、 番茄、 辣椒、 大豆和马铃薯等多种农作物造成了较为严重 的危害。 因此, 对该科害虫进行防控和减灾已迫在眉睫。 长期以来, 国内外防治夜蛾科害虫 主要依赖化学农药, 可以有效控制其种群数量的增长, 起到了保护 农业产业的有益作用。 然 而, 随着化学农药滥用, 不合理施用对土壤、 水体等环境已造成了诸多负面影响, 同时也在 一定程度上直接导致害虫抗药性的产生。 因此, 探索新型环境友好病害防治方法已迫在眉 睫。 与人工合成的化学农药相比, 运用天然病原细菌开发而来的细菌杀虫剂对害虫进行生 物防治, 具有杀虫特异性强、 绿色环保、 研发成本低等特点, 是害虫绿色 防控领域的重要方 式, 具备巨大的应用潜力。 [0003]苏云金芽孢杆菌 ( Bacillus thuringiensis , 简称Bt) 是一种自然界广泛分布的革 兰阳性细菌, 其主要特征是在菌体形成芽胞的同时, 伴随有大量杀虫晶体蛋白 (包括 Cry和 Cyt晶体蛋白) 的产生, Bt伴胞晶体蛋白对鳞翅目、 鞘翅目、 双翅目等多种害虫具有毒杀作 用。 以Bt作为微生物杀虫剂, 具有高效专一、 无毒、 不污染环境等特点, 被广泛应用于农业、 林业和卫生害虫的防治。 然而, 随着以 Bt杀虫晶体蛋白为基础的杀虫剂的大量使用及 Bt转 基因抗虫植物的大规模推广, 害虫抗性问题不断在实验室及田间试验中得到证实, 现已发 现至少有十几种昆虫对 Bt及其杀虫 晶体蛋白产生了抗性。 其主要原因在于, 目前虽已分离 并报到了多种 Bt亚种或血清型, 但高毒力野生型菌株资源依然较少, 导致以现有 Bt资源而 开发而来的商品化的 Bt制剂菌种种类单一, 难以承担在 Bt转基因抗虫植物大规模种植下对 害虫进行有效防控的重任。 因此, 需要不 断从野外分离出更多高毒力 Bt菌株来补充现有 Bt 资源, 筛选并分离出新的高毒力 Bt杀虫基因, 丰富杀虫基因资源库, 为转基因作物与工程菌 株商业化提供新的基因来源, 从而提高 Bt转基因产品的抗虫效果。 因此, 寻找 新的Bt资源对 我国的生物防治 有着十分重要的意 义。 发明内容 [0004]针对上述现有 Bt制剂易产生抗性而野生菌株资源短缺的问题, 本发明的目的在于 提供了一株对棉铃虫和粘虫有高效杀 虫活性的野生型 苏云金芽孢杆菌 。 [0005]为了达到上述目的, 本发明从湖南省浏阳市大围山镇山区丛林中采集大量土壤样 品, 集中对芽孢杆菌菌株进行筛选, 对筛选出的芽孢杆菌进 行编号命名和菌种保存, 以棉铃说 明 书 1/7 页 3 CN 115369057 A 3
专利 一株苏云金芽孢杆菌B172及其应用
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