(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210699669.9 (22)申请日 2022.06.20 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.24846 202 2.05.09 CGMCC NO.24847 202 2.05.09 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 段娜　屈安安　郑鑫　徐永洞　 周嘉良　郭钰　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 张璐 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A61K 35/742(2015.01)A61P 15/14(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A01K 1/015(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一株对奶牛乳房炎致病菌有拮抗作用的芽 孢杆菌及其应用 (57)摘要 本发明涉及粪污处理技术领域， 具体涉及一 株对奶牛乳房炎致病菌有拮抗作用的芽孢杆菌 及其应用。 本发 明所提供的芽孢杆菌可在牛粪中 快速增殖， 并对奶牛源无乳链球菌、 金黄色葡萄 球菌、 大肠杆菌有拮抗作用， 且具有较好的纤维 素、 蛋白质、 淀粉分解能力， 所述的芽孢杆菌 可作 为抑制菌及菌剂应用于牛粪再生垫料的生产和 使用过程中。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 115322921 A 2022.11.11 CN 115322921 A 1.一株芽孢杆菌， 其特征在于， 保藏编号为CGMCC  NO.24847， 可在牛粪环境中快速增 殖。 2.一种菌剂， 其特 征在于， 含有权利要求1所述芽孢杆菌 。 3.一种发酵方法， 其特征在于， 以权利要求1所述的芽孢杆菌作为发酵菌， 以纤维素、 蛋 白质或淀粉作为 碳源进行发酵。 4.一种芽孢杆菌发酵液或发酵上清液， 其特征在于， 所述芽孢杆菌发酵液由权利要求3 所述发酵方法发酵得到； 所述芽孢杆菌发酵上清液， 由芽孢杆菌发酵液经离心、 过滤后得 到。 5.权利要求1所述芽孢杆菌或权利要求2所述菌剂 或权利要求3所述发酵方法或权利要 求4所述芽孢杆菌发酵 液或发酵 上清液在抑制奶牛乳房炎致病菌中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述奶牛乳房炎致病菌包括奶牛源无乳链 球菌、 金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌 。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述芽孢杆菌或所述菌剂 或所述芽孢杆菌 发酵液或发酵 上清液在环境温度为25 ‑35℃时， 具 备抑制奶牛乳房炎致病菌的作用。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 芽孢杆菌发酵上清液对奶牛源无乳链球菌 的抑菌圈直径为15.7m m以上。 9.权利要求1所述芽孢杆菌或权利要求2所述菌剂 或权利要求3所述发酵方法或权利要 求4所述芽孢杆菌发酵 液或发酵 上清液在制备或使用牛粪再生垫料中的应用。 10.一种牛粪再生垫料， 其特征在于， 可抑制牛粪垫料中乳房炎致病菌的增加； 所述牛 粪再生垫料含有权利要求 1所述芽孢杆菌或权利要求2所述菌剂或权利要求4所述芽孢杆菌 发酵液或发酵 上清液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115322921 A 2一株对奶牛乳房炎致病菌有拮抗作用的 芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及粪污处理领域， 尤其是涉及一株对奶牛乳房炎致病菌有拮 抗作用的芽 孢杆菌及其应用。 背景技术 [0002]牛粪再生垫料是以牛粪为原料， 通过好氧发酵等技术手段生产的一种牛床垫料， 已经成为牛粪资源化利用的一种重要技术手段。 相较传统垫料， 牛粪再生垫料具有原料获 取便利且廉价的先天优势， 但与沙子等无机垫料相比， 牛粪本身就携带许多致病菌， 且作为 有机物更容 易造成微 生物的繁殖， 因此 杀菌是生产牛粪再生垫料 过程中必不可少的步骤。 [0003]而在实际生产过程中， 奶牛乳房炎致病菌并不能被彻底杀灭， 且在牛粪再生垫料 使用过程中， 奶牛场为了节约 成本， 垫料不能做到每天更换， 这个过程中通过牛体、 空气流 动等进入垫料的致病微生物会 逐渐随着积累和繁殖而增多， 包括链球菌(Streptococcus)、 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus  aureus)、 大肠杆菌(Escherichia  coli)等奶牛乳房炎 致病菌。 奶牛乳房炎会导致牛奶产量下降、 品质降低、 奶牛死亡和淘汰， 被认为是奶制品行 业成本最高的疾病之一。 因此， 一种适用于牛粪再生垫料生产和使用过程中抑制奶牛乳房 炎致病菌的微 生物菌剂是目前市场需要的。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供一株对奶牛乳房炎致病菌有拮抗作用的芽孢杆菌及其应用。 [0005]第一方面， 本发明提供一株芽孢杆菌， 保藏编号 为CGMCC NO.24847。 [0006]本发明从牛粪中， 筛选出对奶牛源无乳链球菌、 金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌抑菌圈 最大的菌株， 进行16s  rRNA测序， 并建立系统发育树， 由16s  rRNA测序结果及系统发育树结 果和形态学分析， 确定抑菌圈最大的菌株为芽孢杆菌， 命名为芽孢杆菌DN ‑2。 [0007]本发明所提供的芽孢杆菌DN ‑2已在2022年5月9日保藏于中国微生物菌种 保藏管 理委员会普通微生物 中心， (简称CGMCC， 地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学 院微生物研究所， 邮编  100101)， 分类命名： 芽孢杆菌Bacillus  sp.， 保藏编号为CGMCC NO.24847。 [0008]第二方面， 本发明提供一种菌剂， 含有上述芽孢杆菌 。 [0009]第三方面， 本发明提供一种发酵方法， 以上述的芽孢杆菌作为发酵菌， 以纤维素、 蛋白质或淀粉作为 碳源进行发酵。 [0010]第四方面， 本发明提供一种芽孢杆菌发酵液或发酵上清液， 所述芽孢杆菌发酵液 由上述发酵方法发酵得到； 所述芽孢杆菌发酵上清液， 由芽孢杆菌发酵液经离心、 过滤后得 到。 [0011]根据本领域技术人员的理解， 本发明还请求保护上述芽孢杆菌或上述菌剂或上述 发酵方法或上述芽孢杆菌发酵 液或发酵 上清液在抑制奶牛乳房炎致病菌中的应用。 [0012]在本发明所提供的应用中， 所述奶牛乳房炎致病菌包括奶牛源无乳链球菌、 金黄说　明　书 1/6 页 3 CN 115322921 A 3