(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210772151.3 (22)申请日 2022.06.30 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.45166 2022.05.23 (71)申请人 山西农业大 学 地址 030801 山西省晋中市太 谷区铭贤南 路1号 (72)发明人 贺俊平　白涛　岳伟东　李东晓　 王巾　赵子惠　李佳容　常倩文　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 苏士莹 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A61K 39/02(2006.01) A61K 39/39(2006.01)A61P 31/04(2006.01) C12R 1/35(2006.01) (54)发明名称 一株丝状支原 体山羊亚种SXTG01及其应用、 丝状支原体山羊亚种疫苗及其制备方法 (57)摘要 本发明属于属于畜牧业动物疫苗技术领域， 具体涉及一株丝状支原体山羊亚种SXTG01及其 应用、 丝状支原体山羊亚种疫苗及其制备方法。 本发明提供了一株丝状支原 体山羊亚种SXTG01， 已进行生物保藏， 保藏于中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心， 保藏编号为CGMCC   No.45166。 本发明从山西省晋中地区出现典型 羊 支原体肺炎症状的多只病羊体内， 取鼻拭子或病 肺， 使用盲传的方式从中分离到一株丝状支原体 山羊亚种SXTG01， 该毒株生长滴度高， 将其灭活 后制备得到的疫 苗， 产抗体效价高、 持续时间长， 能够有效防控丝状支原体山羊亚种感染， 具有广 泛的市场应用前 景。 权利要求书1页 说明书13页 序列表2页 附图6页 CN 115044513 A 2022.09.13 CN 115044513 A 1.一株丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma  mycoides  subspecies  capri， Mmc)SXTG0 1， 其特征在于， 所述丝状支原体山羊亚种SXTG01保藏于中 国微生物菌种保藏管 理委员会普通 微生物中心， 保藏编号 为CGMCC No.45166。 2.权利要求1所述的丝状支原体山羊亚种SXTG01在制备丝状支原体山羊亚种 疫苗中的 应用。 3.一种丝状支 原体山羊亚种疫苗的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 将权利要求1所述的丝状支 原体山羊亚种SXTG01 灭活后与佐剂混合。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述灭活的方式包括： 将权利要求1所 述的丝状支 原体山羊亚种SXTG01与灭活剂混合。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于， 所述灭活的时间为4～24h； 所述灭活 剂包括β‑丙内酯和/或二乙烯亚胺。 6.根据权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述二乙烯亚胺的工作浓度为 0.2wt.％～0.6wt.％； 所述β ‑丙内酯的工作浓度为0.0 5wt.％～0.2wt.％。 7.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述佐剂包括Mont anideTMISA78、 ISA   201和IMS 1313中的一种或多种。 8.根据权利要求7所述的制备方法， 其特征在于， 所述佐剂与灭活所得抗原的体积比为 (1～2):1。 9.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述灭活前， 还包括： 将所述丝状支原 体山羊亚种SXTG01的菌液按照1:10的体积比接种到液体培养基中培养， 分离， 得到支原体 浓缩菌液； 所述液体培养基以1L计包括： PPLO肉汤粉21g、 葡萄糖5g、 10％精氨酸溶液10mL、 1％醋 酸铊溶液 10mL、 25％酵母浸出液100mL、 10倍MEM  10mL、 8万单位/mL青霉素溶液10mL、 马血清 100mL、 1％酚红溶 液1.0mL和余 量的双蒸水。 10.根据权利要求9所述的制备方法， 其特征在于， 所述培养的温度为35～37℃， 时间为 2～3d； 所述菌液中丝状支 原体山羊亚种SXTG01的菌量 为1×1015CCU/mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115044513 A 2一株丝状支原体山羊亚种SXTG01及其应用、 丝状支原体山羊 亚种疫苗及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于畜牧业动物疫苗技术领域， 具体涉及一株丝状支原体山羊亚种SXT G01 及其应用、 丝状支 原体山羊亚种疫苗及其制备 方法。 背景技术 [0002]丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma  mycoides  subspecies  capri， Mmc)是一种系 统性感染病原， 可导致羊发生乳腺炎、 关节炎、 角膜炎肺炎和败血症等综合征， 引起羊支原 体肺炎(Mycoplasmal  pneumonia  of sheep and goats， MPSG)。 19 51年Longley首次分离到 丝状支原体山羊亚种， Mmc的广泛流行对 全世界的养羊业均造成了严重的经济损失。 [0003]针对丝状支原体山羊亚种 感染， 使用抗生素治疗易产生耐药性， 且存在肉品药物 残留问题， 因此研制安全有效的疫苗是当前防控该病工作的最优选项。 在 疫苗研制方面， 灭 活疫苗通过适宜的化学方法将病原灭活， 不可逆转地破坏其基因组， 既使病原微生物丧失 感染和增殖的能力， 又不破坏其免疫原性蛋白， 使其仍具有刺激机体产生体液免疫和细胞 免疫的能力， 再通过混合佐剂的方式刺激机体对灭活抗原产生更强的免疫反应、 延长其在 机体内的作用时间。 然而现有的丝状支原体山羊亚种灭活疫苗存在诸多不足， 不能有效防 控丝状支 原体山羊亚种感染， 对羊支 原体肺炎都起到 很高的保护效果。 发明内容 [0004]本发明的目的在 于提供一株丝状支原体山羊亚种SXT G01及其应用、 丝状支原体山 羊亚种疫苗及其制备方法， 丝状支原体山 羊亚种SXTG01生长滴度高， 产生效价高、 持续时间 长的抗体， 有效防控丝状支 原体山羊亚种感染。 [0005]本发明提供了一株丝状支原体山羊亚种SXTG0 1， 所述丝状支原体山羊亚种SXTG01 丝状支原体山 羊亚种SXTG01中 国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心， 保藏编号为 CGMCCNo.45166。 [0006]本发明还提供了上述技术方案所述的丝状支原体山羊亚种SXTG01在制备丝状支 原体山羊亚种疫苗中的应用。 [0007]本发明还提供了一种丝状支 原体山羊亚种疫苗的制备 方法， 包括如下步骤： [0008]将上述技术方案所述的丝状支 原体山羊亚种SXTG01 灭活后与佐剂混合。 [0009]优选的， 所述灭活的方式包括： 将上述技术方案所述的丝状支原体山羊亚种 SXTG01与灭活剂混合。 [0010]优选的， 所述灭活的时间为 4～24h； 所述灭活剂包括β ‑丙内酯和/或二乙烯亚胺。 [0011]优选的， 所述二乙烯亚胺的工作浓度为0.2wt.％～0.6wt.％； 所述β ‑丙内酯的工 作浓度为0.0 5wt.％～0.2wt.％。 [0012]优选的， 所述佐剂包括Mo ntanideTMISA 78、 ISA 201和IMS 1313中的一种或多种。 [0013]优选的， 所述佐剂与灭活所 得抗原的体积比为(1～ 2):1。说　明　书 1/13 页 3 CN 115044513 A 3